Anexplo

Création, archivage et exploration fonctionnelle de modèles intégrés pour la compréhension des dysfonctionnements et pathologies physiologiques.

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Création, archivage et exploration fonctionnelle de modèles intégrés pour la compréhension des dysfonctionnements et pathologies physiologiques.

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Plateforme Anexplo

Localisée sur 8 sites, la plateforme Anexplo propose un continuum d’activités de la création à l’archivage de modèles animaux, poissons zèbres, rongeurs, lapins, volailles, petits ruminants. Elle procède également à leur exploration fonctionnelle ex vivo et in vivo dans divers contextes normaux et pathologiques, afin de mieux comprendre le vivant et les dysfonctionnements physiologiques conduisant à des pathologies.

Le décryptage des interactions hôtes-pathogènes dans des modèles intégrés est essentielle à la mise au point de nouveaux traitements contre les maladies infectieuses émergentes ou réémergentes. Anexplo participe à l’élaboration de stratégies innovantes à travers le développement de modèles animaux et la mise en place d’équipements de pointe pour l’exploration fonctionnelle non invasive ou l’expérimentation dans des environnements de niveau de sécurité 1, 2 et 3. La plateforme offre ainsi à la communauté scientifique une complémentarité de services accessibles en prestations de service ou collaborations.

Des équipements de haute technologie sont mis à disposition, notamment un trieur de cellules, un microscope confocal biphotons en BSL3, des systèmes d’échographie doppler, IRM/SRM 7T et PET/CT, ainsi que du matériel de calorimétrie, de télémétrie, d’analyse du comportement et de la cognition pour l’exploration fonctionnelle.

Expertises et services

Zootechnie : élevage et production par croisement génétique de modèles expérimentaux (poissons zèbres, rats et souris), mise à disposition des laboratoires et des équipements pour l’utilisation des animaux à des fins scientifiques (niveau de confinement 1, 2, 3 et axénique), expertise vétérinaire pour le suivi sanitaire et le bien-être animal,
Transgenèse : création de modèles de souris génétiquement modifiées par transgenèse additive classique ou à façon, utilisant des technologies de pointe (CRISPR-Cas9) ou correctives,
Cryoconservation et décontamination : archivage, échange et décontamination de lignées de souris et de rats génétiquement modifiés,
Microchirurgie : production de modèles de souris et rats de pathologies cardiaques, rénales…
Phénotypage : analyse fonctionnelle ex vivo sur tissus, organes ou fluides biologiques et in vivo en confinement de niveau 1 à 3, exploration métabolique et cardiovasculaire en conditions standards ou lors de modifications environnementales, implantation et suivi de la progression tumorale et analyse du comportement,
Exploration non invasive du petit animal : mise à disposition d’équipements et accompagnement pour l’imagerie à résonance magnetique (IRM), l'imagerie nucléaire (PET/CT) et l'imagerie ultrasonore,
Histopathologie expérimentale : analyse histologique et immunohistochimique, numérisation et lecture de lames, quantification numérique d’immunomarquages et de lésions pathologiques, formation,
Biologie médicale et histologie comparative : expertise, conseil et gestion de projet en histologie, hématologie, hémostase, cytologie et biochimie médicale pour la recherche fondamentale et clinique,
Réglementation : formation à l'utilisation d’animaux à des fins scientifiques.

Moyens et équipements

Zootechnie : 3 zones conventionnelles pour rongeurs et poissons, 5 zones EOPS, zone SOPF, 5 zones de quarantaine, 3 zones de confinement de niveau 2, 2 zones de confinement de niveau 3 en infectiologie, zone d’élevage et d’expérimentation pour les animaux axéniques et matériel spécifique de zootechnie (PSM II, hottes, autoclaves, isolateurs, PSM III, portoirs ventilés IVC, appareil d’anesthésie, sas chimique, isocages…),
Transgénèse et cryoconservation : 2 postes de microinjection pour la transgénèse additive, 2 postes pour l'injection de cellules ES, 2 appareils de cryoconservation MiniCool et Freezal, incubateur à CO₂, loupes binoculaires et étireuse pour capillaire,
Phénotypage in vivo : MiniSpec pour la mesure de la composition corporelle, PhenoMaster pour la calorimétrie indirecte au repos et à l’exercice, tapis roulants d’entrainement, chambres métaboliques et système de télémétrie,
Phénotypage et analyse ex vivo : Luminex, Pentra 400, Micros 60 et calorimètre Ika C200,
Phénotypage comportemental : test d’agrippement, rotarod, rotomètre et roues d’activité Ugo Basile, tapis roulant Panlab Harvard Apparatus, labyrinthe en croix surélevé Bioseb, test de conditionnement à la peur Imetronic, système de trajectométrie Ethovision Noldus, intellicages TSE Systems, test de préférence de place conditionnée et piscine de Morris Ugo Basile,
Exploration non invasive du petit animal : IRM/SRM PharmaScan BioSpec 7T Bruker pour l'imagerie anatomique et fonctionnelle, NanoScan PET/CT Mediso pour l'imagerie fonctionnelle nucléaire, Vevo 2100 VisualSonics et Aixplorer Supersonic Imagine pour l'imagerie ultrasonore,
Histopathologie et immunomarquage : automate de déshydratation et d'imprégnation Histocore Pearl Leica, station d’enrobage Arcadia Leica, cytocentrifugeuse Cytospin 4, station de congélation Snapfrost, cryostat CM1950 Leica, microtome RM2145 Leica, graveuse de lames, colleuse de lamelles CV5030 Leica, automate de coloration ST5020 Leica, scanner de lames 3DHISTECH Pannoramic Flash III,
Biologie médicale et histologie comparative : automates pour hématologie, hémostase, immunoanalyse et électrophorèse, cytomètre en flux, agrégomètre, osmomètre et analyseurs de gaz du sang, d'hémoglobine et de biochimie.

<hr>Robot de lavage de cages avec une capacité de 13 000 cages par semaine.

<hr>Image obtenue à partir du nanoScan PET/CT avec rendu volumique PET (couleur) et CT (noir et blanc) chez la souris après injection de [18F]FDG.

<hr>Larves de poissons transgéniques avec expression de la GFP dans les intestins.

Comment soumettre un projet ?

Vous pouvez contacter Anexplo par mail à l’adresse anexplo@genotoul.fr. Les contacts de chaque service sont également disponibles sur le site de la plateforme. Lors d’une phase préparatoire, une étude de faisabilité sera réalisée et des réunions seront organisées entre le service concerné et le demandeur afin de définir le pilotage, les ressources, le planning et le suivi du projet. Lors de la phase de réalisation, des réunions régulières seront mises en place pour suivre l’avancement du projet et la traçabilité des résultats. A l’issue des expérimentations, une phase de clôture sera l’occasion de restituer les résultats, faire le bilan et mesurer la satisfaction du demandeur.

Exemple d'utilisation

C/EBPα, une nouvelle cible pour lutter contre certaines leucémies agressives

Des scientifiques de l’Université de Genève et du Centre de recherches en cancérologie de Toulouse (CRCT) ont découvert un mécanisme de mort cellulaire qui pourrait être exploité pour tuer les cellules tumorales responsables de leucémies aiguës myéloïdes (LAM).

Les LAM sont des tumeurs malignes du sang qui affectent la production de cellules sanguines. Elles sont causées par une prolifération incontrôlée de cellules immunitaires appelées progéniteurs myéloïdes et peuvent causer des symptômes graves, voire mortels. Les mutations sur le gène FLT3 sont courantes chez les patients atteints de LAM et elles sont associées à un mauvais pronostic.

Les chercheurs ont identifié la protéine C/EBPα, un facteur de transcription clé dans la différenciation des cellules myéloïdes, comme une nouvelle cible thérapeutique potentielle. Dans une étude publiée dans la revue Cancer Discovery, ils ont montré que l’activation coordonnée de C/EBPα et FLT3 augmente la production d’acides gras mono-insaturés dans les cellules de LAM mutées FLT3 via l’enzyme SCD. L’inhibition du gène FLT3 provoque des changements métaboliques en réponse à la régulation négative de C/EBPα-SCD, qui induit l’oxydation des lipides de la membrane cellulaire et parvient ainsi à tuer les cellules leucémiques.

En ciblant la régulation de C/EBPα-SCD, cette découverte ouvre la voie à une nouvelle stratégie thérapeutique fondée sur l’utilisation de molécules capables de provoquer une mort cellulaire par ferroptose, caractérisée par l’accumulation de lipides oxydés toxiques dans les cellules de LAM mutées FLT3. Cette découverte constitue une avancée importante pour les patients atteints de LAM avec mutation FLT3, car elle pourrait conduire à de nouveaux traitements pour lutter contre cette forme agressive de cancer du sang. Pour être menée à bien, l'étude a bénéficié des services des plateformes Genotoul Anexplo et Metatoul.

Pour en savoir plus : Sabatier M. et al. (2023). C/EBPα confers dependence to fatty acid anabolic pathways and vulnerability to lipid oxidative stress-induced ferroptosis in FLT3-mutant leukemia. Cancer Discovery, 13(7):1720-1747.